date:2023-06-09 15:20:43
神經(jīng)科學(xué)是一個(gè)多學(xué)科領(lǐng)域，專(zhuān)注于神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育、組織、功能和疾病。
在分子和細(xì)胞水平上研究神經(jīng)系統(tǒng)（NS）對(duì)于理解神經(jīng)疾病的發(fā)展及其治療至關(guān)重要。ibidi為細(xì)胞培養(yǎng)和顯微鏡研究神經(jīng)細(xì)胞在體外生理?xiàng)l件下的形態(tài)、功能和行為提供了不同的解決方案。
大鼠背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞和雪旺細(xì)胞，在ibidi μ-Slide 8 Well中培養(yǎng)，并對(duì)神經(jīng)絲（綠色）、NGFR（品紅色）和 DAPI（白色）進(jìn)行染色。該圖像是使用 LEICA SP8X 激光掃描顯微鏡獲得的。圖片來(lái)源：Tamara Weiss, Division of Plastic and Reconstructive Surgery, Medical University of Vienna, Austria
神經(jīng)細(xì)胞分析
神經(jīng)細(xì)胞分析研究構(gòu)成神經(jīng)系統(tǒng)的不同細(xì)胞類(lèi)型的特征、功能和相互作用。神經(jīng)系統(tǒng)由多種類(lèi)型的細(xì)胞組成，包括神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和干細(xì)胞，每種細(xì)胞具有不同的作用和功能。
顯微鏡是研究神經(jīng)細(xì)胞和深入了解神經(jīng)系統(tǒng)形態(tài)、結(jié)構(gòu)和動(dòng)力學(xué)的關(guān)鍵技術(shù)。雖然組織學(xué)樣本（如腦切片）的制備和成像在19世紀(jì)后期已經(jīng)成為可能，但過(guò)去50年先進(jìn)成像技術(shù)的發(fā)展，如共聚焦顯微鏡和雙光子顯微鏡，已經(jīng)推動(dòng)了組織學(xué)的可視化神經(jīng)元結(jié)構(gòu)和過(guò)程。新抗體、熒光探針和標(biāo)記技術(shù)的結(jié)合使得在固定樣本（例如，在免疫熒光分析中）以及在活細(xì)胞、組織或生物體中描繪不同的神經(jīng)元成分及其復(fù)雜的相互作用網(wǎng)成為可能。
最近，隨著超分辨率顯微鏡的發(fā)明及其克服光衍射屏障（~200 nm）的能力，甚至可以看到小到突觸囊泡(尺寸為40nm)的結(jié)構(gòu)。
可以使用 live cell imaging活細(xì)胞成像技術(shù)在生理?xiàng)l件下實(shí)時(shí)研究動(dòng)態(tài)細(xì)胞過(guò)程，如：突觸形成、軸突生長(zhǎng)和樹(shù)突棘動(dòng)力學(xué)。
綜上所述，成像技術(shù)的最新進(jìn)展使得神經(jīng)元過(guò)程和形態(tài)的可視化具有高時(shí)空分辨率，這在理解大腦和神經(jīng)的功能方面發(fā)揮著重要作用。
在ibidi μ-Plate 96孔板中源自人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞 (iPSC) 的多巴胺神經(jīng)元的免疫熒光圖像。該圖顯示神經(jīng)突延伸以及 β-III 微管蛋白（綠色）和酪氨酸羥化酶（紅色）的表達(dá)。DAPI（藍(lán)色）用于核染色。
圖片由Image Courtesy: Asuka Morizane, Center for iPS Cell Research and Application, Kyoto University, Kyoto, Japan提供
ibidi為神經(jīng)科學(xué)研究做出的貢獻(xiàn)：
ibidi開(kāi)發(fā)的解決方案和產(chǎn)品可促進(jìn)涵蓋神經(jīng)生物學(xué)研究不同方面的各種細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)定。
使用ibidi產(chǎn)品的神經(jīng)相關(guān)文獻(xiàn)已超過(guò)9000份。
這些產(chǎn)品包括具有各種幾何形狀和涂層的實(shí)驗(yàn)室器皿，為培養(yǎng)和成像甚至復(fù)雜的培養(yǎng)神經(jīng)元細(xì)胞提供理想的表面。此外，ibidi Stage Top Incubators培養(yǎng)箱和ibidi Pump System泵/流體剪切力系統(tǒng)是多功能工具，可以在生理?xiàng)l件下培養(yǎng)細(xì)胞，從而實(shí)現(xiàn)神經(jīng)元細(xì)胞的長(zhǎng)期活細(xì)胞成像。
解決方案
ibidi為神經(jīng)細(xì)胞分析提供的解決方案：
ibidi μ-Slides 和 μ-Dishes 包括不同的幾何形狀，結(jié)合了日常細(xì)胞培養(yǎng)和功能性細(xì)胞檢測(cè)的最佳條件。它們是免疫熒光、活細(xì)胞成像和高分辨率顯微鏡的理想選擇。ibidi實(shí)驗(yàn)室器皿具有 ibidi Polymer Coverslip 聚合物蓋玻片和 ibidi Glass Coverslip 玻璃蓋玻片。
ibidi channel slides 通道載玻片，尤其是μ-Slide VI 0.4 六通道載玻片，特別適用于免疫熒光染色：它們的幾何形狀非常適合精確交換少量介質(zhì)，這在免疫細(xì)胞化學(xué)染色過(guò)程中是必需的。通道幾何形狀非常適合小體積免疫熒光測(cè)定。
Chamber Slides, removable可拆卸/可移除腔室載玻片，是低通量和高通量免疫熒光實(shí)驗(yàn)的理想選擇，適用于長(zhǎng)期儲(chǔ)存用玻璃蓋玻片固定的樣品。
ibidi μ-Plates 是高通量藥物篩選和大規(guī)模敲低和過(guò)表達(dá)實(shí)驗(yàn)的理想選擇，具有高分辨率顯微鏡讀數(shù)。這些成像板與使用 ANSI/SLAS (SBS) 標(biāo)準(zhǔn)格式的機(jī)器人和讀板機(jī)兼容。ibidi μ-Plates 有24、96和384孔板，有 ibidi Polymer Coverslip 聚合物蓋玻片和 ibidi Glass Coverslip 玻璃蓋玻片，其自發(fā)熒光極低，可用于無(wú)干擾熒光顯微鏡檢查。
ibidi Stage Top Incubators 培養(yǎng)箱為每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)倒置顯微鏡上的活細(xì)胞成像提供生理?xiàng)l件。包括CO2和O2的控制（如：用于缺氧實(shí)驗(yàn)）以及主動(dòng)控制濕度。可用于載玻片、培養(yǎng)皿以及多孔板。
用戶評(píng)論
“μ-Slide 8 Well high 八孔高壁腔室載玻片效果非常棒，尤其是對(duì)于我們的iPSC衍生神經(jīng)元。我們將它們用于活細(xì)胞顯微成像，結(jié)果非常好。我們對(duì)載玻片非常滿意！” Federica Bono, University of Brescia, Italy
“我們測(cè)試了μ-Slide 8 Well high Grid-500八孔高壁500um格子底腔室載玻片，將其作為長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)的新選擇。為了用不同的涂層成分檢查表面，我們接種神經(jīng)元祖細(xì)胞（從第16天開(kāi)始），并根據(jù)我們的分化方案培養(yǎng)它們。我們很高興地發(fā)現(xiàn)，這些細(xì)胞現(xiàn)在已經(jīng)培養(yǎng)超過(guò)60天，并且發(fā)育得很好。我們注意到，Vitrogel和Geltrex涂層都與載玻片的表面形成了穩(wěn)定的結(jié)合，并且沒(méi)有脫離。”Robin Friedrich, Hamm-Lippstadt University of Applied Sciences, Germany
ibidi μ-Slide 8 Well high Grid-500神經(jīng)元祖細(xì)胞的活細(xì)胞成像圖像。圖片顯示第50天分化的神經(jīng)元。圖片由Robin Friedrich, Hamm-Lippstadt University of Applied Sciences, Germany提供
參考文獻(xiàn)
Immunofluorescence of Neuronal Cells
The μ-Slide 8 Well was used for the cultivation and immunostaining of rat Schwann cells (rSC), fibroblasts (rFB), and dorsal root ganglion (rDRG) neurons.
Millesi F, Weiss T, Mann A, Haertinger M, Semmler L, Supper P, Pils D, Naghilou A, Radtke C. Defining the regenerative effects of native spider silk fibers on primary Schwann cells, sensory neurons, and nerve-associated fibroblasts. FASEB J. 2021 Feb;35(2):e21196. doi: 10.1096/fj.202001447R.
Imaging of Neuronal CAD Cells
The μ-Dish 35mm, high was used to culture and immunostain neuronal CAD (Cath.a-differentiated) cells to quantify tunneling nanotubes connected cells (TNT) and filopodia connected cells, as well as to image the transfer of DiD-labelled vesicles between two cell populations.
Bhat S, Ljubojevic N, Zhu S, Fukuda M, Echard A, Zurzolo C. Rab35 and its effectors promote formation of tunneling nanotubes in neuronal cells. Sci Rep. 2020 Oct 8;10(1):16803. doi: 10.1038/s41598-020-74013-z.
Live Cell Imaging of Cortical Neurons
The μ-Slide 8 Well was used for confocal live cell imaging of Purkinje neurons.
Motori E, Atanassov I, Kochan SMV, Folz-Donahue K, Sakthivelu V, Giavalisco P, Toni N, Puyal J, Larsson NG. Neuronal metabolic rewiring promotes resilience to neurodegeneration caused by mitochondrial dysfunction. Sci Adv. 2020 Aug 28;6(35):eaba8271. doi: 10.1126/sciadv.aba8271.
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